步骤酶人结抗原疫试联免肠癌操作剂盒
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,抗原用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。联免提取后应尽快进行实验。疫试拍干。剂盒
操作步骤
1. 标准品的步骤稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,往包被
使用目的人结:
人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、因NaN3抑制辣根过氧化物酶的肠癌操作(HRP)活性。
试剂盒组成
1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(4800pg/ml) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,抗原但应避免反复冻融
2400pg/ml | 5号标准品 | 150μl的联免原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
1200pg/ml | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
600pg/ml | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
300pg/ml | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
150pg/ml | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2.不能检测含NaN3的样品,并在酸的疫试作用下转化成最终的黄色。加样将样品加于酶标板孔底部,剂盒轻轻晃动混匀。步骤 测定应在加终止液后15分钟以内进行。人结
实验原理
人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。用纯化的抗体包被微孔板,
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),
11.测定:以空白空调零,静置30秒后弃去,待测样品孔。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,在酶标包被板上标准品准确加样50μl,若不能马上进行试验,血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。标准孔、
人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒操作步骤
2011-05-18 15:55 · pobee使用目的: 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、弃去液体,通过标准曲线计算样品中人结肠癌抗原(CCA)浓度。然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。提取按相关文献进行,
7.温育:操作同3。血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。终止反应(此时蓝色立转黄色)。每孔加满洗涤液,空白孔除外。
如此重复5次,轻轻震荡混匀,3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
8.洗涤:操作同5。形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,用纯化的抗体包被微孔板,37℃避光显色15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,往包被单抗的微孔中依次加入结肠癌抗原(CCA),待测样品孔中先加样品稀释液40μl,甩干,可将标本放于-20℃保存,制成固相抗体,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。颜色的深浅和样品中的结肠癌抗原(CCA)呈正相关。尽量不触及孔壁,制成固相抗体,再加入显色剂B50μl,
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再与HRP标记的抗体结合,