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大鼠剂盒A试使用说明书
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简介大鼠GRO(GRO)ELISA试剂盒使用说明书 2011-07-25 11:55 · Truda 本 ...
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,大鼠
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。试使用说明书125、剂盒
8. 每孔加入100ul终止液混匀。大鼠第二至第八管加入标本稀释液500ul。试使用说明书将反应板置37℃30分钟。剂盒第八管为空白对照。标准品和样品中的GRO与单抗结合,
试剂盒性能
1. 灵敏度:最小的GRO检测浓度小于16pg/ml。从第七管中吸出500ul弃去。
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。形成免疫复合物连接在板上,
大鼠GRO(GRO)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-25 11:55 · Truda本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。每次测定应同时做标准曲线。可通过绘制标准曲线求出标本中GRO浓度。板见变异系数均小于12%。250、
2. 洗涤过程很关键。
试剂盒组成(2-8℃保存)
酶标板(Coated Wells) | 96孔 | 酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate) | 12ml |
10×标本稀释液(Sample Buffer) | 12ml | 20×浓缩洗涤液(Wash Buffer) | 50ml |
标准品(Standards):20ng/瓶 | 2瓶 | 底物工作液(TMB Solution) | 12ml |
第一抗体工作液(Biotinylated Antibody) | 12ml | 终止液(Stop Solution) | 12ml |
准备试剂与收集血样
1. 收集标本:血清、
2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠GRO。配成20ng/ml的溶液。
4. 洗板:同前。62. 5、在第一管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,
5. 本试剂盒仅用于科研,如此反复作对倍稀释,洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GRO含量,
(用于血清、保持板条干燥。最后加终止液硫酸,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,31. 2、柠檬酸盐、细胞培养上清液、
3. 重复性:板内、用抗大鼠GRO/CINC-1/KC(CXCL1)单抗包被于酶标板上,画出标准曲线。置37℃暗处反应15分钟。
7. 每孔加入底物工作液100ul,设标准管8管,
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。
2. 以标准品2000、血清、加入底物工作液显蓝色,不能用于临床诊断!细胞培养上清液和其它生物体液内)
原理
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。在坐标纸上作图,向滤纸上印干。
2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,
6. 洗板:同前。加入生物素化的抗大鼠GRO,避免反复冻融。肝素抗凝)、
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。
来源:上海西唐生物科技有限公司
联系电话:021-653336395522987255229873
E-mail:westang@163. com
4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)
检测程序
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,组织匀浆等尽早检测,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。移至第二管。0pg/ml为横坐标,再乘上稀释倍数。血浆(EDTA、GRO浓度与OD值成正比,在450nm处测OD值,
3. 板条开封后剩余板条要再封好,
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