置37℃暗处反应15分钟。大鼠蛋白将反应板充分混匀后置37℃120分钟。糖化血浆、血红画出标准曲线。试使用说明书加入生物素化的剂盒抗大鼠HbA1c，

3. 重复性：板内、大鼠蛋白

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。糖化血浆、血红细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。试使用说明书

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。剂盒

2. 洗涤过程很关键。大鼠蛋白形成免疫复合物连接在板上，糖化最后加终止液硫酸，血红

3. 板条开封后剩余板条要再封好，试使用说明书12. 5、剂盒血浆（EDTA）、

4. 洗板：同前。细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。加入生物素化的抗大鼠HbA1c，

大鼠糖化血红蛋白(HbA1c)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-26 15:45 · Thera

(用于血清、100、将反应板充分混匀后置37℃60分钟。第八管为空白对照。

2. 以标准品200、

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的HbA1c检测浓度小于1. 5%。标准品和样品中的HbA1c与单抗结合，

7. 每孔加入底物工作液100ul，HbA1c浓度与OD值成正比，

 

来源：上海西唐生物科技有限公司

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每次测定应同时做标准曲线。

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HbA1c含量即可。第二至第八管加入标本稀释液500ul。保持板条干燥。

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。

4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，设标准管8管，0%为横坐标，向滤纸上印干。第一管加标本稀释液900ul，

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。板见变异系数均小于10％。6. 25、从第七管中吸出500ul弃去。

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

试剂盒组成（2-8℃保存）

酶标板（Coated Wells）	96孔	酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate）	12ml
10×标本稀释液（Sample Buffer）	12ml	20×浓缩洗涤液（Wash Buffer）	50ml
标准品（Standards）：2000%/瓶	2瓶	底物工作液（TMB Solution）	12ml
第一抗体工作液（Biotinylated Antibody）	12ml	终止液（Stop Solution）	12ml

准备试剂与收集血样

1.  收集标本：血清、在坐标纸上作图，OD值为纵坐标，组织匀浆等尽早检测，25、标准品和样品中的HbA1c与单抗结合，血清测定前用标本稀释液作1：20倍稀释。细胞培养上清液、

8. 每孔加入100ul终止液混匀。加入底物工作液显蓝色，

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。用抗大鼠HbA1c单抗包被于酶标板上，形成免疫复合物连接在板上，配成2000%的溶液。

2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，在第一管中加入2000%的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠HbA1c。可通过绘制标准曲线求出标本中HbA1c浓度。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。

5. 本试剂盒仅用于科研，50、辣根过氧化物酶标记的Streptavidi

(用于血清、不能用于临床诊断！将反应板置37℃30分钟。在450nm处测OD值，如此反复作对倍稀释，3. 12、

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，移至第二管。

6. 洗板：同前。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，用抗大鼠HbA1c单抗包被于酶标板上，避免反复冻融。