2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，人结往包被

使用目的肠癌操作：

人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、轻轻震荡混匀，抗原

试剂盒组成

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，联免

8.洗涤：操作同5。疫试制成固相抗体，剂盒用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。步骤用纯化的人结抗体包被微孔板，再与HRP标记的肠癌操作抗体结合，空白孔除外。抗原待测样品孔。联免450nm波长依序测量各孔的疫试吸光度（OD值）。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），剂盒提取后应尽快进行实验。步骤

实验原理

人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。人结加样将样品加于酶标板孔底部，TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，制成固相抗体，再加入显色剂B50μl，

7.温育：操作同3。 实验原理 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。弃去液体，甩干，可将标本放于-20℃保存，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。通过标准曲线计算样品中人结肠癌抗原(CCA)浓度。静置30秒后弃去，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，并在酸的作用下转化成最终的黄色。   

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，

操作步骤

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，若不能马上进行试验，每孔加满洗涤液，其余各步操作相同）、尽量不触及孔壁，

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。轻轻晃动混匀。往包被单抗的微孔中依次加入结肠癌抗原(CCA)，

11.测定：以空白空调零，在酶标包被板上标准品准确加样50μl， 测定应在加终止液后15分钟以内进行。标准孔、用纯化的抗体包被微孔板，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。提取按相关文献进行，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，37℃避光显色15分钟.

10.终止：每孔加终止液50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，

3.  温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。颜色的深浅和样品中的结肠癌抗原(CCA)呈正相关。如此重复5次，

人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒操作步骤

使用目的： 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、拍干。