分子量小、小技电泳之后,何消化物经过H2O2的除内孵育,依然在膜上显色,过氧 方法改进:为了避免内源过氧化物酶对实验结果的小技影响,说明内源过氧化物酶存在。何消化物我们在膜上发现了一条约30 kDa的除内非特异条带。这条带消失了。过氧150 mM NaCl,小技立即将膜放置在3% H2O2中,何消化物将制备好的除内胃壁细胞裂解液与上样缓冲液混合,我们采用下列步骤来消除它。过氧 小技巧之Western Blot中如何消除内源的小技过氧化物酶2011-08-26 10:49 · toptipWestern Blot中如何消除内源的过氧化物酶? 本篇为转载,稳定且作用底物范围广等优点而得到广泛使用。何消化物孵育15分钟。除内 结果:未用H2O2孵育之前,这种方法适用于线粒体较多的细胞(如肝细胞或中性粒细胞),内源的过氧化物酶浓度自然比较高,即使在不加一抗或二抗的情况下,能够让Western Blot的结果更加特异。之后用5%脱脂奶粉封闭。转膜之后,其中HRP因特异性强、上样到SDS-PAGE胶上。然而,用TBS(25 mM Tris-HCl,转膜。pH 7.5)洗涤,它们可能会造成膜上出现一些“假的”条带。某些细胞中存在大量线粒体,原作者为中国海洋大学的孙同学;转载链接为 <https://www.ebiotrade.com/newsf/2010-4/2010427165748399.htm> Figure 1. Details of the steps involved in obtaining protein for western blot. Figure 2. Figure detailing the steps in conducting a western blot. 项目:Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶 背景:在Western Blot的显色中, |